
间充质干细胞(MSCs)因其强盛的再生和免疫退换才能,在再生医学和疾病养息界限展现出高大后劲。收尾2025年2月,包括中国、好意思国、欧盟等专家已获批上市的MSCs家具共有16款,涵盖骨髓、脐带、脂肪等多种开头,相宜症主要波及免疫退换与组织诞生界限[1]。
干细胞外泌体(MSCs-Exo)作为干细胞分泌的一种具有膜结构的细小囊泡,包含了卵白质、脂质、核酸等多种生物活性分子,可作为细胞间通信的遑急介质,参与细胞间的信号传递和物资交换[2]。MSCs-Exo不仅剿袭了干细胞的多种生物学功能,还具备一些私有的上风,如具有较低的免疫原性,不易引起免疫放弃响应;可在体内稳重存在并施展作用,大略穿越血脑障蔽等生理障蔽到达病变部位;具有细腻的生物相容性和安全性等[3]。联系词,选拔传统的培养瓶和细胞工场进行MSCs 2D培养存在诸多局限,尤其是MSCs-Exo坐褥方面,后果低下、产量不稳重、质料难以适度等问题严重制约了其临床运用。
传统2D培养的逆境
伸开剩余77%图1. 传统MSCs培养主要选拔培养瓶和细胞工场等2D培养神志
传统的 2D 平面坐褥步调(图1)无法精准适度pH、DO等流程参数,占大地积大,处事密集型,耗材(包括东谈主员驻防、环境保重)老本高。选拔2D培养MSCs上清索求外泌体时存在以下问题:
1、资源销耗:培养上清常被行动废液丢弃,其中富含的外泌体资源白白流失。
2、后果低下:外泌体索求依赖于麇集捣毁上清,设施繁琐,得率低。
3、批次各异:不同批次上清开头不一,外泌体产量和质料波动大,难以保证一致性。
固定床响应器的冲破
图2. 同腾新创GEL-G® Culture Ad60固定床生物响应器(Ad60 FBR)
同腾新创研发的GEL-G® Culture Ad60固定床生物响应器(Ad60 FBR,图2)为外泌体坐褥带来了转换性的不停决策,主要有以下上风:
1.全阻塞自动化培养:供稳重可控的培养环境,最大规则减少期凌风险,确保细胞健康助长和外泌体稳重分泌。
2.多批次不息受货:可依期麇集培养上清,收尾外泌体的高效、不息坐褥,大幅进步产量1-2个数目级(图3)。
3.稳重高效的开头:固定床响应器提供捏续、稳重的外泌体开头,有用不停批次各异问题,保证外泌体质料的一致性(图4)。
图3. MSCs选拔Ad60 FBR进行3D培养的产量
A. Ad60 FBR与细胞工场和微载体培养比拟UC-MSCs-Exo产量更高;B. Ad60 FBR培养各种干细胞多批次收货和单批次收货外泌体产量对比;C. Ad60 FBR培养AD-MSCs多批次收货外泌体产量稳重
图4. Ad60 FBR培养的UC-MSCs上清原液中外泌体质料分析
A. 纳米颗粒跟踪分析工夫(NTA)检测颗粒浓度和直径;B. 电镜检测外泌体神志;C. WB检测多批次收货上清中外泌体记号卵白
改日推测
Ad60 FBR的运用将极大股东外泌体有计划和产业化程度,为疾病会诊、药物寄递、再生医学等界限提供更优质、更稳重的外泌体资源。咱们信服,这项工夫将成为外泌体坐褥的主流想法,为东谈主类健康职业带来更多福音。
参考文件
[1] Phinney Donald G, Pittenger Mark F, Concise Review: MSC-Derived Exosomes for Cell-Free Therapy.[J] .Stem Cells, 2017, 35: 851-858.
[2] Bebelman Maarten P, Smit Martine J, Pegtel D Michiel et al. Biogenesis and function of extracellular vesicles in cancer.[J] .Pharmacol Ther, 2018, 188: 1-11.
[3] Tkach MercedesNG28彩票, Théry Clotilde, Communication by Extracellular Vesicles: Where We Are and Where We Need to Go.[J] .Cell, 2016, 164: 1226-1232.
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